可檢測種屬

（人，小鼠，大鼠，植物，魚，蝦，蟹，牛，羊，狗，貓，微生物，細胞，土壤等動植物）(不同種屬樣本需要不同種屬的試劑盒）

可以檢測樣本為

（血清，血漿，唾液，尿液，組織，細胞上清，裂解液等）

產(chǎn)品檢測目的

樣本水平表達（定量檢測，定性檢測，酶活性檢測）

一、、靈敏、特異的抗體；

二、穩(wěn)定的重復性和可靠性；

三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；

四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型；

五、限度的節(jié)省實驗經(jīng)費。

常用方法及原理如下：

1. 夾心法：

夾心法常用于檢測大分子抗原，一般的操作步驟為:

a. 將具有一性的抗體固著（coating）于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗體

b. 加入待測檢體，檢體中若含有待測的抗原，則其會與塑膠孔盤上的抗體進行一性鍵結

c. 洗去多余待測檢體，加入另一種對抗原一的一次抗體，與待測抗原進行鍵結

d. 洗去多余未鍵結一次抗體，加入帶有酶的二次抗體，與一次抗體鍵結

e. 洗去多余未鍵結二次抗體，加入酶底物使酵素呈色，以肉眼或儀器讀取呈色結果

原理：針對抗原分子上2個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相抗體和酶標抗體，將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標抗原結合物。

2. 間接法

間接法常用于檢測抗體，一般的操作步驟為：

a. 將已知的抗原固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余的抗原。

b. 加入待測檢體，檢體中若含有待測的一次抗體，則其會與塑膠孔盤上的抗原進行一性鍵結。

c. 洗去多余待測檢體，加入帶有酶的二次抗體，與待測的一次抗體鍵結。

d. 洗去多余未鍵結二次抗體，加入酶底物使酶呈色，藉儀器（ELISA reader）測定塑膠盤中的吸光值（OD值），以評估有色終產(chǎn)物的含量即可測量待測抗體的含量。

原理：利用酶標記的抗抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體。

3. 競爭法

競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機制，一般用于檢測小分子抗原，其操作步驟為：

a. 將具有一性的抗體固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗體

b. 加入待測檢體，使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤上的抗體進行一性鍵結

c. 加入帶有酶的抗原，此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進行一性鍵結，由于塑膠孔盤上固著的抗體數(shù)量有限，因此當檢體中抗原的量越多，則帶有酶的抗原可鍵結的固著抗體就越少，亦即，兩種抗原皆競相與塑膠孔盤上抗體鍵結，即所謂競爭法之由來。

d. 洗去檢體與帶有酶的抗原，加入酶底物使酶呈色，當檢體中抗原量越多，代表塑膠孔盤內留下之帶有酶的抗原越少，顯色也就越淺。

e. 當需要偵測無法獲得兩種以上單一性抗體的抗原，或是不易得到足夠的純化抗體以固著于孔盤上時，一般會考慮使用競爭法ELISA。

小鼠磷酸化一氧化氮合成酶（p-eNOS）ELISA試劑盒原理：將特抗體包被于固相載體表面，經(jīng)洗滌后分成兩組：一組加酶標記抗原和被測抗原的混合液，另一組只加酶標記抗原，經(jīng)孵育洗滌后加底物顯色，這兩組底物降解量之差，即為所要測定的未知抗原的量。